المشاركات

عرض المشاركات من أبريل ٢٥, ٢٠١٠

الهجرة الكهربائية (Gel electrophoresis)..

صورة
تقنية الهجرة الكهربائية (Gel electrophoresis).. قـبل البدء بهذه التقنية لابد معرفة أساس عملها .. وهو انزيم اسمه restriction enzyme .. وشو ذا ؟؟ تقنية الـ restriction enzyme بعد استخراج الـDNA .. يتمـ معاملته بإنزيمات القطع (restriction enzyme ).. ثم يتم ايجاد ترتيب القواعد النتروجينية بإستخدام تقنية الرحلان الكهربائي(gel electrophoresis ).. ذلك من اجل ايجاد البصمة الوراثية .. مـاهو الـ restriction enzyme؟؟!! هو انزيم(بروتين) يستخرج من البكتيريا.. يقوم بالتعرف على ترتيب قصير ومحدد من القواعد النيتروجينية في الشريط الوراثي.. ثم يقوم بقطع تلك المناطق المحددة بالـ DNA.. فــائدته: في حال تعرض الخلية البكتيرية لهجوم فيروسي.. وكانت الخلية تحوي الانزيم.. سوف يرتبط بالشريط الوراثي للفيروس مسبب تحطمه وبالتالي حماية الخلية البكتيرية .. انــواعه: له ثلاثة انواع : نوع1, نوع2 و نوع 3 (كل نوع له خصائص ومميزات .. لانحتاج لتفصيل أكثر ..) <<طبعاً يخلط الانزيم مع خليط الحمض النووي ويوزع بالجل.. اثناء عملية الفصل يقوم الانزيم بالقطع عند اماكن محددة ..مثال الصورة >> === نـــ ع ـــود .. .. ..تقن

الهجرة الكهربائية (Gel electrophoresis)..

صورة
تقنية الهجرة الكهربائية (Gel electrophoresis).. قـبل البدء بهذه التقنية لابد معرفة أساس عملها .. وهو انزيم اسمه restriction enzyme .. وشو ذا ؟؟ تقنية الـ restriction enzyme بعد استخراج الـDNA .. يتمـ معاملته بإنزيمات القطع (restriction enzyme ).. ثم يتم ايجاد ترتيب القواعد النتروجينية بإستخدام تقنية الرحلان الكهربائي(gel electrophoresis ).. ذلك من اجل ايجاد البصمة الوراثية .. مـاهو الـ restriction enzyme؟؟!! هو انزيم(بروتين) يستخرج من البكتيريا.. يقوم بالتعرف على ترتيب قصير ومحدد من القواعد النيتروجينية في الشريط الوراثي.. ثم يقوم بقطع تلك المناطق المحددة بالـ DNA.. فــائدته: في حال تعرض الخلية البكتيرية لهجوم فيروسي.. وكانت الخلية تحوي الانزيم.. سوف يرتبط بالشريط الوراثي للفيروس مسبب تحطمه وبالتالي حماية الخلية البكتيرية .. انــواعه: له ثلاثة انواع : نوع1, نوع2 و نوع 3 (كل نوع له خصائص ومميزات .. لانحتاج لتفصيل أكثر ..) <<طبعاً يخلط الانزيم مع خليط الحمض النووي ويوزع بالجل.. اثناء عملية الفصل يقوم الانزيم بالقطع عند اماكن محددة ..مثال الصورة >> === نـــ ع ـــود .. .. ..تقن

فصل الدنا

صورة
× نضيف العينة في انبوب نضيف عليها انزيم SDS- proteinase K الغرض منه ترسيب المكونات حول شريط الـDNA بدون التأثير على الشريط نفسه .. × نضيف المحلول المنظم للعينة ونضعها في انبوب الطرد المركزي ..وهذا شكلها :   × نخلطها بواسطة جهاز الـVortex لمدة 10 دقائق.. وهذا الـVortex shaker: × نضعها في جهاز الطرد المركزي لمدة 10 دقائق..وهذا هو: × نخرجها من الجهاز وسينتج 3 طبقات.. راسب-ورائق.. نتخلص من الرائق ونأخذ الراسب (الراسب يحوي الشريط النووي) × نضيف على الراسب مايلي: EDTA +10%SDS + proteinase K. × نحفظ العينة في حمام مائي عند درجة حرارة 37 ºم ليلة كاملة .. تحت التحريك المستمر .. ويقوم الجهاز بتحريك العينة وحفظ حرارتها .. وهذا نموذج من الجهاز: × نضيف الفينول ونرج العينة بجهاز الـVortex مره اخرى لمدة 10 دقائق.. × نضع العينة بجهاز الطرد المركزي –أيضاً مره أخرى- لمدة 10 دقائق ثم نحصل على طبقتين.. × نأخذ الرائق ونضيف لها الكلروفورم.. ثم طرد مركزي لمدة 5 دقائق..ثم ناخذ الراسب الناتج.. × نضيف للراسب الايثانول ..ثم طرد مركزي..نتخلص من الرائق.. وسنلاحظ شريط الـ DNA عل

فصل الدنا

صورة
× نضيف العينة في انبوب نضيف عليها انزيم SDS- proteinase K الغرض منه ترسيب المكونات حول شريط الـDNA بدون التأثير على الشريط نفسه .. × نضيف المحلول المنظم للعينة ونضعها في انبوب الطرد المركزي ..وهذا شكلها :   × نخلطها بواسطة جهاز الـVortex لمدة 10 دقائق.. وهذا الـVortex shaker: × نضعها في جهاز الطرد المركزي لمدة 10 دقائق..وهذا هو: × نخرجها من الجهاز وسينتج 3 طبقات.. راسب-ورائق.. نتخلص من الرائق ونأخذ الراسب (الراسب يحوي الشريط النووي) × نضيف على الراسب مايلي: EDTA +10%SDS + proteinase K. × نحفظ العينة في حمام مائي عند درجة حرارة 37 ºم ليلة كاملة .. تحت التحريك المستمر .. ويقوم الجهاز بتحريك العينة وحفظ حرارتها .. وهذا نموذج من الجهاز: × نضيف الفينول ونرج العينة بجهاز الـVortex مره اخرى لمدة 10 دقائق.. × نضع العينة بجهاز الطرد المركزي –أيضاً مره أخرى- لمدة 10 دقائق ثم نحصل على طبقتين.. × نأخذ الرائق ونضيف لها الكلروفورم.. ثم طرد مركزي لمدة 5 دقائق..ثم ناخذ الراسب الناتج.. × نضيف للراسب الايثانول ..ثم طرد مركزي..نتخلص من الرائق.. وسنلاحظ شريط الـ DNA عل

الخلايا الجذعية

  الخلايا الجذعية الجنينية (وتسمى كذلك بالخلايا الأولية أو الأساسية أو المنشأ او الجذرية) هي خلايا لها القدرة على الانقسام والتكاثر لتعطي أنواعًا مختلفة من الخلايا المتخصصة cells لم”ىٌفىكمَِّ كخلايا العضلات وخلايا الكبد والخلايا العصبية والخلايا الجلدية أي من الممكن أن تعطي أي نوع من الخلايا. وهذه الميزة هي التي جعلت العلماء والأطباء يهتمون بها ويفكرون في استخدامها لعلاج العديد من الأمراض المزمنة والتي لا يوجد لها علاج شاف إلى الآن. وتعتبر الخلايا الجذعية الجنينية مشابهة للخلايا الجسدية حيث تحتوي على 46 كروموسوماً. يعتقد أن للخلايا الجذعية أو لخلايا المنشأ كما يسميها البعض مستقبلاً عظيماً في علاج عدد كبير من الأمراض والإعاقات، ويشتغل كثير من العلماء حول العالم لتطوير تقنيات تسمح باستعمالها للعلاج، لكن استعمالها يثير الكثير من الجدل. ما هي الخلايا الجذعية؟ لمعظم خلايا الجسم وظيفة معينة لا يمكن تغييرها، فمثلا، لا يمكن لخلية كبد القيام بمهمة خلية من القلب. لكن الخلايا الجذعية تختلف، ورغم كونها ما زالت في طور البحث والتجريب، يعتقد أن لها القدرة على أن تتحول إلى عدد من أنواع

الكروموسومات

صورة
بسم الله الرحمن الرحيم تعريف: تراكيب خطية اسطوانة الشكل توجد دائما بين قطبي الخلية حقيقية النواة المنقسمة ولها القدرة على التضاعف الذاتي . وهي التراكيب التي تحتوى على المادة الوراثية والتي تعمل كنواقل لتخزين ونقل وتعبير وتطور المعلومات الوارثية , وهي تراكيب حركية ( متغيرة). الكروماتين:Chromatin معقد الدنا ومايرتبط به من بروتينات خلال الفترة التي تكون فيها الخلية حقيقية النواة غير منقسمة . وهو تركيب حركي يمكن أن يغير شكله ومكوناته خلال دورة الخلية. الكروموسوم : 1 جزيء من الحلزون المزدوج للدنا+ بروتينات هسيتونية + بروتينات غير هسيتونية +كميات قليلة من الدنا. 1. دنا الكروموسومات : (الشكل 17) يحتوي الدنا الكروموسومي على ثلاثه أنواع من التتابعات اللازمة لتضاعف وانعزال الكروموسومات: أ- مناشئ التضاعف :Replication Origins of تتابعات نيوكليوتيديه توجد داخل الدنا الكروموسومي وهي ضرورية لبدء تضاعف الدنا وبالتالي الكروموسومات . ب – السنتروميرات :Centromeres تتابعات نيوكليوتيدية عالية التكرار في الدنا وهي ضرورية للانعزال الدقيق للكروموسومات خلال الانقسام النووي (الميتوزي وا

تاريخ الهندسة الوراثية

تواريخ هامة في منشأ وتطور الهندسة الوراثية بسم الله الرحمن الرحيم السلام عليكم ورحمة الله وبركاته الموضوع التالي يحتوي علي تواريخ لأهم القفزات والإكتشافات والثورات العلمية التى كان لها الفضل فى منشأ وتطور الهندسة الوراثية، وكذلك بعض الإنجازات التى كانت بعيدة حتى عن الخيال 1866م : بدأ علم الوراثة على يد الراهب وعالم النبات النمساوي جريجور مندل الذي وضع القوانين الأساسية للوراثة في منتصف القرن التاسع عشر. أسس مندل قوانينه على دراساته التي تناولت الأنماط الوراثية لبازلاء الحدائق وذلك عن طريق دراسة انتقال الصفات الوراثية من الآباء للأبناء و نسب توزعها بين افراد الأجيال المختلفة. وقد ظل عمله مجهولاً حتى عام 1900م، بالرغم من أنه نشر نتائج تجاربه في عام 1866م. 1900 م : أعاد كل من دى فريز وباستون وآخرون اكتشاف قوانين مندل فى علم الوراثة ثم نشرها فى دورية تصدرها جمعية محلية فى النمسا. وقد كانت جهود هؤلاء العلماء هى الخطوة الأولى التى بدأها علماء البيولوجيا فى التطوير المعاصر فى علم الوراثة، والتى حولت هذا العلم إلى علم تجريبى دقيق. 1903 م : افترض "ستون" أن الجينات تقع ع

البصمة الوراثية

صورة
ماهي البصمه الوراثيه ........... بداية ما هو الـ "DNA"؟ "(DNA)": هي المادة الوراثية الموجودة في خلايا جميع الكائنات الحية"، وهي التي تجعلك مختلفًا، إنها الشفرة التي تقول لكل جسم من أجسامنا: ماذا ستكون؟! وماذا ستفعل عشرة ترليونات (مليون مليون) من الخلايا؟!. وطبقًا لما ذكره العالمان: "واطسون" و "كريك" في عام 1953 فإن جزيء الحمض النووي "(DNA)" يتكون من شريطين يلتفان حول بعضهما على هيئة سلم حلزوني، ويحتوي الجزيء على متتابعات من الفوسفات والسكر، ودرجات هذا السلم تتكون من ارتباط أربع قواعد كيميائية تحت اسم أدينينA ، ثايمين T، ستيوزين C، وجوانين G، ويتكون هذا الجزيء في الإنسان من نحو ثلاثة بلايين ونصف بليون قاعدة. كل مجموعة ما من هذه القواعد تمثل جينًا من المائة ألف جين الموجودة في الإنسان، إذًا فبعملية حسابية بسيطة نجد أن كل مجموعة مكونة من 2.200 قاعدة تحمل جينًا معينًا يمثل سمة مميزة لهذا الشخص، هذه السمة قد تكون لون العين، أو لون الشعر، أو الذكاء، أو الطول، وغيرها (قد تحتاج سمة واحدة إلى مجموعة من الجينات لتمثيلها

الهندســــــــــــة الوراثية

الهندســــــــــــــة الوراثية حتى تاريخ 1970 ميلادية كان إجراء الأبحاث على الحمض النووي ( الدي إن أي)من أصعب الأمور التي كانت تواجه علماء الوراثة و الكيمياء.و كانت معظم الأبحاث تجرى بشكل غير مباشر على الحمض النووي الريبوزي (الأر إن أي)أو البروتين.و لكن الحال تحول بشكل كامل فأصبح علم الوراثة المتعلق بفحص الدي إن أي(و المعروف بعلم الوراثة الجزيئية)من أسهل العلوم و أكثرها تطورا.لقد أصبح من السهل صنع نسخ عديدة من أي جين (مورث) أو مقطع محدد من الدي إن أي.كما أمكن معرفة تسلسل الأحماض النووية بسرعة تتعدى المئات في اليوم الواحد.كما استطاع العلماء استكشاف الجينات الموجودة في على الكروموسومات كما استطاعوا تغيير و تعديلها بشكل الذي يريدون و ليس هذا فحسب بل استطاعوا أن يعيدوا هذه الجينات المعدلة إلى الخلية و غرزها في الكروموسوم الذي يريدون.كما أمكن إنتاج كميات كبيرة من البروتينات كالهرمونات و اللقاحات المختلفة و التي كانت تنتج في السابق من الجثث الميتة أو تستخلص من الحيوانات و التي كانت تحوفها المخاطر من انتقال العدوى إلى الإنسان.كما أن هذه الثورة العلمية فتحة المجال أمام الكثيرين من محب

قراءة تسلسل المادة الوراثية ( نظريا)

صورة
قراءة تسلسل المادة الوراثية ( نظريا) .. مكتشف هذه الطريقة عالم بيرطاني يدعى سانجر وتسمي chain termination method طريقة قطع السلسلة ، و مبدأها العلمي بسيط جدا و لكي نفهم المبدا ركزوا في التالي : اللبنات الأساسية لبناء المتسلسلة الوراثية Sequence عبارة عن A C G T و لنأخذ نظرة عن التركيب الجزيئي لهذه القواعد في الحالة الطبيعية DnTPS تدعم عملية التوصيل elongation و لكن في الحالة الثانية بعد نزع ذرة الأوكسجين في DDnTPS فأنها لا تدعم التوصيل ببعض و يحصل ايقاف لتركيبة السلسلة . طيب حط في الحسبان فلو استخدمنا تفاعل PCR بالظروف التالية A C T عبارة عن DnTPS و لكن اضفنا معها G على أنها DDnTP لا تدعم الارتباط أي لن يرتبط بعدها اي قاعدة و ستوقف التفاعل على التمبلت او خيط DNA الموجود التجربة : المواد : منتج PCR قد سبط عزله بطول معين 100 او 300 او 1000 قاعدة متسلسلة bp TaqPol انزيم البلمرة بفرز او محاليل منظمة للتفاعل قواعد سليمة من ACT قاعدة منقوصة من G برايمر أو بادئة خاصة بالمنتج نعمل الماستر مكس و نحطها في جهاز الدوران الحراري Thermal Cycler سيظهر لدينا منتج بأطوال متباين