الهجرة الكهربائية (Gel electrophoresis)..

تقنية الهجرة الكهربائية (Gel electrophoresis)..

قـبل البدء بهذه التقنية لابد معرفة أساس عملها .. وهو انزيم اسمه restriction enzyme ..

وشو ذا ؟؟

تقنية الـ restriction enzyme
بعد استخراج الـDNA .. يتمـ معاملته بإنزيمات القطع (restriction enzyme )..
ثم يتم ايجاد ترتيب القواعد النتروجينية بإستخدام تقنية الرحلان الكهربائي(gel electrophoresis )..
ذلك من اجل ايجاد البصمة الوراثية ..


مـاهو الـ restriction enzyme؟؟!!
هو انزيم(بروتين) يستخرج من البكتيريا..
يقوم بالتعرف على ترتيب قصير ومحدد من القواعد النيتروجينية في الشريط الوراثي..
ثم يقوم بقطع تلك المناطق المحددة بالـ DNA..


فــائدته:
في حال تعرض الخلية البكتيرية لهجوم فيروسي.. وكانت الخلية تحوي الانزيم..
سوف يرتبط بالشريط الوراثي للفيروس مسبب تحطمه وبالتالي حماية الخلية البكتيرية ..

انــواعه:
له ثلاثة انواع : نوع1, نوع2 و نوع 3 (كل نوع له خصائص ومميزات .. لانحتاج لتفصيل أكثر ..)

<<طبعاً يخلط الانزيم مع خليط الحمض النووي ويوزع بالجل.. اثناء عملية الفصل يقوم الانزيم بالقطع عند اماكن محددة ..مثال الصورة >>




===

نـــ ع ـــود ....

..تقنية الـرحلان الكهربائي (Gel electrophoresis)..


هو تقنية تستخدم لفصل الاحماض النووية DNA & RNA أو جزيئات البروتين..
وذلك بإستخدام تيار كهربائي يعمل على الجل..

استخدامه:
عادةً يستخدم لغراض التحليل .. لكـن قد يتم استخدامه كـ تقنية تحضيرية قبل استخدام تقنيات أًخرى مثل الاستنساخ, كتلة الطيف, تسلسل الحمض النووي,rflp و الـ PCR .

الفصـل:
الجل يستخدم لفصل الجزيئات المستهدفة. وفي معظم الحالات ، هو crosslinked polymer ذو التكوين المسامي ويجري اختيار مادة محددة على أساس الوزن والهدف من تحليلها.

الرحلان الكهربائي يعتمد على القوة الكهرو حركية التي تستخدم لتحريك الجزيئات(العينة) من خلال الجل.
بوضع الجزيئات(العينة) في فتحات داخل الجل و يتمـ تشغيل التيار الكهربائي ،
تتحرك الجزيئات بطريقة صفوف بمعدلات مختلفة ، وعادة ما تحدد بالوزن ، في اتجاهالقطب الموجب اذا كان سلبا.. أو في اتجاه القطب السالب اذا كان ايجابيا ..

فوائده:
يستخدم في الطب الشرعي ، وعلم الاحياء الجزيئي ، علم الوراثه ، والكيمياء الحيويه وعلم الاحياء المجهريه. تظهر النتائج وتحليلها من الناحية الكميه عن طريق تصوير الجل بالاشعه فوق البنفسجيه وجهاز التصوير الجل.

وهذه صورة لعينة :



هنا فيديو يشرح هذه التقنية بسلاسة

http://cache.eb.com/new-multimedia/wmv/dnafin001.wmv


تعليقات

المشاركات الشائعة من هذه المدونة

كتاب : مقدمة في التقنية الحيوية د.سعد العتيبي و د.محمود رفعت

البصمة الوراثية واستخداماتها

Intron and Exon